小鼠羧化不全骨鈣素（ucOC）ELISA試劑盒操作流程

小鼠羧化不全骨鈣素（ucOC）ELISA試劑盒操作流程：
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿(mǎn)洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長(cháng)處測定各孔的OD值。

為了減小過(guò)失，是先稀釋再加樣。而針對這位客戶(hù)所遇到的疑問(wèn)，我公司技術(shù)人員是這樣說(shuō)明的：
1. 前者測的是稀釋和移液的過(guò)失，后者只需移液過(guò)失。
2. 一般都是稀釋一次，分兩孔吧。同濃度的分復孔。
3. 由于是從同一原液稀釋?zhuān)话悴豢紤]稀釋過(guò)失(稀釋過(guò)失是存在的)，都是稀釋到想要的倍數直接分孔(而不是逐個(gè)稀釋?zhuān)@樣可以使稀釋過(guò)失減小)。
4. 復孔是為了掃除移液體積，板的影響，以及其他系統過(guò)失的，要求復孔的濃度是一起的。稀釋后分孔能滿(mǎn)意此要求，逐個(gè)稀釋不能。