HB101 感受態(tài)細胞

產(chǎn)品簡介：

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更新時間：2020-09-08

產(chǎn)品僅用于科研購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購產(chǎn)品、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細胞價格并預約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。點擊了解更多克隆感受態(tài)細胞。

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細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
Pro Atrial Natriuretic Peptide, Pro-ANP Elisa Kit三白草酮（標準品）Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格：96T

Big Endothelin, Big ET Elisa Kit大黃素-8-β-D-吡喃葡萄糖苷（標準品）Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格：48T

Big Endothelin, Big ET Elisa Kit異蓮心堿（標準品）Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格：96T

Big Endothelin, Big ET Elisa Kit蓮心堿高氯酸鹽（標準品）Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格：48T

Big Endothelin, Big ET Elisa Kit丁烯基苯酞（標準品）Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格：96T

very late appearing antigen, VLA Elisa Kit茯苓酸（標準品）Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格：48T

very late appearing antigen, VLA Elisa Kit柯里拉京（標準品）Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格：96T

Calcitonin, CT Elisa Kit人參皂苷F3（標準品）Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格：48T

Calcitonin, CT Elisa Kit槐定堿（標準品）Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格：96T

Osteocalcin/Bone gla protein, OT/BGP Elisa Kit去甲澤拉木醛（標準品）Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格：48T

Osteocalcin/Bone gla protein, OT/BGP Elisa Kit鹽酸去氫駱駝蓬堿（標準品）Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格：96T

soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand, sRANKL Elisa Kit巖大戟內酯B（標準品）Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格：48T

soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand, sRANKL Elisa Kit路路通內酯（標準品）Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格：96T

Thyroid Stimulating Hormone, TSH Elisa Kit甘油三油酸酯（標準品）Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格：48T

Thyroid Stimulating Hormone, TSH Elisa Kit長春花堿（標準品）Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格：96T

Cortisol Elisa Kit長春花堿Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格：48T
HB101 感受態(tài)細胞CLASP2  細胞連接相關蛋白2一抗    * 0.2ml Magnesium silicate

DIS3  有絲分裂控制蛋白dis3一抗    * 0.2ml Sodium Lascorbate

DPEP3  膜二肽酶3一抗    * 0.2ml Sodium pyrophosphate

DSN1  著絲粒相關蛋白DSN1一抗    * 0.2ml Ammonium bicarbonate

DUSP13  雙特異性酶13一抗    * 0.2ml Ammonium chloride

Flotillin 1  脂閥結構蛋白1一抗    * 0.2ml Salicylic acid

GAJ/MND1  減數(shù)分裂核分裂蛋白1一抗    * 0.2ml Chitin

GLP2R  胰高血糖素樣肽2受體一抗    * 0.2ml Coenzyme A, free acid, hydrate (COA)
操作方法：
1. 感受態(tài)細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質?；蜻B接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少13 h。
基本共性:
1、所有的細胞表面均有由磷脂雙分子層與鑲嵌蛋白質及糖被構成的生物膜，即細胞膜。
2、所有的細胞都含有兩種核酸：即DNA與RNA。
3、作為遺傳信息復制與轉錄的載體。
4、作為蛋白質合成的機器—核糖體，毫無例外地存在于一切細胞內，核糖體，是蛋白質合成的機器，在細胞遺傳信息流的傳遞中起重要作用。
5、所有細胞的增殖都以一分為二的方式進行分裂。
6、能進行自我增殖和遺傳
7、新陳代謝
8、細胞都具有運動性，包括細胞自身的運動和細胞內部的物質運動
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
產(chǎn)品僅用于科研采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。