七星庫道蟲(chóng)探針?lè )晒舛縋CR檢測試劑盒應用案例

七星庫道蟲(chóng)探針?lè )晒舛縋CR檢測試劑盒應用案例：

樣品 DNA 的制備

1.用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝（一管式病毒 DNAout 的成分）。產(chǎn)品僅用于科研

稀釋陽(yáng)性對照（以 10E2-10E7 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對照，只提供可以直接使用的長(cháng)為 86bp 的 DN段作為陽(yáng)性對照。

2.標記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。

3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。

4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對照。放冰上待用。5.換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對照。放冰上待用。

6.換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對照。放冰上待用。

7.換槍頭，在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對照到 4 號管中，得1×10E4 拷貝/μL 的陽(yáng)性對照。放冰上待用

8.重復上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對照。放冰上待用。設置 qPCR 反應（20  μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）

9.在 PCR 管中加入下列成分。產(chǎn)品僅用于科研

注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時(shí)間；4．循環(huán)次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。