進(jìn)口ELISA試劑盒是一種敏感性高、特異性強、重復性好的ELISA試劑盒,其試劑安穩、易保留、操作簡(jiǎn)練、作用區分客觀(guān)等要素,適宜于大規模篩查實(shí)驗又能夠用于少數標本的檢查,能夠做定性實(shí)驗也能夠做定量分析。
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人心型脂肪酸結合蛋白(h-FABP)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人心型脂肪酸結合蛋白(h-FABP)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
一、操作前仔細閱讀進(jìn)口elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)
嚴格依照說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行標準化操作。不同批號的試劑不混合。值得改善的是,只有經(jīng)過(guò)重復的試驗,如洗盤(pán)的數量,才能加以改善。
二、點(diǎn)評試劑的實(shí)用性
試劑的穩定性對準確度非常重要。在啟用ELISA試劑盒之前,應重復檢測陰性和陽(yáng)性對照品和樣品,試劑僅在試劑符合要求后才能運用。
三、檢驗技術(shù)人員應具備試驗室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗
測技術(shù)人員可以熟練操作試驗儀器儀表,具有一定的總結和分析問(wèn)題的才能,能及時(shí)、妥善地處理ELISA試劑盒試驗中呈現的意外狀況。
四、加樣要準確、快速
樣品添加的不準確度和酶制劑用量的不確認度直接影響顯色效果。此外,顯色深度和A值的確認與顯色劑和終液體的參加量有關(guān),因而樣品的裝載應謹慎。需要在一定時(shí)間內完成采樣的試驗,假如采樣速度慢,會(huì )呈現差錯,試劑會(huì )露出很長(cháng)時(shí)間,特別是當室溫過(guò)高時(shí),保質(zhì)期會(huì )縮短乃至失效。
五、嚴控ELISA試劑盒試驗反應時(shí)間
進(jìn)口elisa試劑盒反應時(shí)間過(guò)長(cháng),酶被滅活,反應時(shí)間過(guò)短,酶與血清中的微生物抗原和抗體不能*結合,產(chǎn)物結構松懈不穩定,易清洗,易產(chǎn)生假陰性。
六、洗刷要*
洗版不*,酶偶聯(lián)物的布景顏色為假陽(yáng)性。此外,清潔劑應該是新鮮的,可以隨時(shí)運用。舊的洗刷劑會(huì )添加布景,也可能呈現假陽(yáng)性。